U biološkom istraživanju obično se koriste polipeptidi s dugim redoslijedom. Za peptide sa više od 60 aminokiselina u nizu, genski izraz i SDS-stranica se uglavnom koriste za njihovo dobivanje. Međutim, ova metoda traje dugo i konačni efekt odvajanja proizvoda nije dobar.
Izazovi i rješenja za dugu sintezu peptida
U sintezi dugih peptida uvijek se suočavaju sa problemom, odnosno sterična prepreka reakciji kondenzacije povećava se s povećanjem slijeda u sintezi, a vrijeme reakcije treba prilagoditi da bi se reakcija bila potpuna. Međutim, duže vrijeme reakcije, proizvode se više nuspojava, a oblik ciljanog peptida se formira. Takvi ostaci - nedostatni peptidni lanci ključne su nečistoće proizvedene u dugoj sintezi peptida. Stoga, u sintezi duge peptida, ključni problem koji moramo savladati je istraživanje visokokvalitetnih reakcijskih uvjeta i reakcijskih metoda, kako bi se kondenzacija aminokiselina napravila sveobuhvatnija i potpunija reakcija kondenzacije aminokiseline. Pored toga, smanjite vrijeme reakcije, jer duže vrijeme reakcije, to su nekontroliranije bočne reakcije, složeniji nusproizvodi. Stoga su sažete sljedeće tri boda:
Može se koristiti mikrovalna sinteza: Za neke aminokiseline susrele se u procesu sinteze koji se ne može integrirati, može se koristiti mikrovalna sinteza. Ova metoda ima izvanredne rezultate i uvelike smanjuje vrijeme reakcije i smanjuje stvaranje dva ključna nusproizvoda.
Metoda sinteze fragmenta može se koristiti: Kada su neki peptidi teško sintetizirati uobičajenim metodama sinteze i nije lako pročistiti, možemo usvojiti cjelokupnu kondenzaciju nekoliko aminokiselina u određenom segmentu peptida u cjelinu u cjelini. Ova metoda također može riješiti mnoge probleme u sintezu.
Može se koristiti sinteza acilhidrazida: Acilhidrazid sinteza peptida je metoda solidne fazne sinteze kmičljeg selektivne reakcije s hidrazidne reakcijom od N-terminala CYS CYS i C-terminala CYS hidrazidne reakcije između stvaranja amidnih veza. Na osnovu položaja CYS-a u peptidnom lancu, ova metoda dijeli cijeli peptidni lanac u više sekvence i sintetizira ih. Konačno, ciljni peptid dobija se putem tečno-fazne reakcije kondenzacije. Ova metoda ne samo u velikoj mjeri ne smanjuje vrijeme s sintezom dugih peptida, već značajno povećava čistoću konačnog proizvoda.
Duga pročišćavanje peptida
Posebnost dugih peptida neminovno vodi do složenih komponenti sirovih peptida. Stoga je i izazov za pročišćavanje dugih peptida HPLC-a. Amiloidna serija procesa pročišćavanja polipeptidnog pročišćavanja, upijajući puno iskustva i uspješno se koristi u pročišćavanju duge peptida. Usvajanjem nove opreme, miješanje višestrukih pročišćavajućih sustava, ponovljenog odvajanja i drugih metoda iskustva, uspešna stopa duge pročišćavanja peptida uvelike je poboljšana.
Vrijeme objavljivanja: 2025-07-03