U biološkim istraživanjima obično se koriste polipeptidi sa dugačkom sekvencom.Za peptide sa više od 60 aminokiselina u sekvenci, ekspresija gena i SDS-PAGE se generalno koriste za njihovo dobijanje.Međutim, ova metoda traje dugo i konačni učinak odvajanja proizvoda nije dobar.
Izazovi i rješenja za dugu sintezu peptida
U sintezi dugih peptida uvijek se susrećemo s problemom, odnosno, sterična smetnja kondenzacijske reakcije raste sa povećanjem sekvence u sintezi, a vrijeme reakcije je potrebno prilagoditi kako bi reakcija bila potpuna.Međutim, što je duže vrijeme reakcije, proizvodi se više nuspojava i formira se dio ciljnog peptida.Takvi ostaci – deficitarni peptidni lanci su ključne nečistoće nastale u dugoj peptidnoj sintezi.Stoga, u sintezi dugog peptida, ključni problem koji moramo prevazići je istražiti visokokvalitetne reakcione uslove i reakcione metode, kako bi reakciju kondenzacije aminokiselina učinili sveobuhvatnijom i potpunijom.Osim toga, smanjite vrijeme reakcije, jer što je duže vrijeme reakcije, nusproizvodi su nekontroliraniji, nusproizvodi su složeniji.Stoga se sumiraju sljedeće tri tačke:
Mikrotalasna sinteza se može koristiti: Za neke aminokiseline koje se susreću u procesu sinteze koje nije lako integrirati, može se koristiti mikrovalna sinteza.Ova metoda ima izvanredne rezultate, uvelike smanjuje vrijeme reakcije i smanjuje stvaranje dva ključna nusproizvoda.
Može se koristiti metoda sinteze fragmenata: Kada je neke peptide teško sintetizirati uobičajenim metodama sinteze i nije ih lako pročistiti, možemo usvojiti cijelu kondenzaciju nekoliko aminokiselina u određenom segmentu peptida u peptidni lanac kao cjelinu.Ova metoda također može riješiti mnoge probleme u sintezi.
Može se koristiti sinteza acilhidrazida: acilhidrazid sinteza peptida je metoda čvrste faze sinteze N-terminalnog Cys peptida i C-terminalnog polipeptida hidrazida hemijska selektivna reakcija između formiranja amidnih veza za postizanje metode peptidne veze.Na osnovu položaja Cys u peptidnom lancu, ova metoda dijeli cijeli peptidni lanac na više sekvenci i sintetiše ih respektivno.Konačno, ciljni peptid se dobija reakcijom kondenzacije u tečnoj fazi.Ova metoda ne samo da značajno smanjuje vrijeme sinteze dugog peptida, već i značajno povećava čistoću konačnog proizvoda.
Dugo peptidno prečišćavanje
Posebnost dugih peptida neminovno dovodi do složenih komponenti sirovih peptida.Stoga je također izazov prečišćavanje dugih peptida HPLC-om.amiloidna serija procesa pročišćavanja polipeptida, apsorbira puno iskustva i uspješno se koristi u prečišćavanju dugog peptida.Usvajanjem nove opreme, miješanjem višestrukih sistema za prečišćavanje, ponovljenim odvajanjem i drugim iskustvenim metodama, stopa uspješnosti dugotrajnog prečišćavanja peptida je znatno poboljšana.
Vrijeme objave: Apr-18-2023