Najskloniji HPLC kvarovima i rješenjima

Kao instrument visoke preciznosti, HPLC može lako dovesti do nekih problematičnih malih problema ako se njime ne rukuje na ispravan način tokom upotrebe.Jedan od najčešćih problema je problem kompresije stupaca.Kako brzo riješiti problem s neispravnim hromatografom.HPLC sistem se uglavnom sastoji od boce rezervoara, pumpe, injektora, kolone, temperaturne komore kolone, detektora i sistema za obradu podataka.Za cijeli sistem, stubovi, pumpe i detektori su ključne komponente i glavne lokacije koje su podložne problemima.

Ključ za pritisak u koloni je oblast kojoj je potrebna posebna pažnja kada se koristi HPLC.Stabilnost pritiska u koloni je usko povezana sa oblikom hromatografskog pika, efikasnošću kolone, efikasnošću odvajanja i vremenom zadržavanja.Stabilnost pritiska u koloni ne znači da je vrednost pritiska stabilna na stabilnoj vrednosti, već da je opseg fluktuacije pritiska između 345kPa ili 50PSI (omogućava upotrebu gradijentnog eluiranja kada je pritisak u koloni stabilan i polako se menja).Previsok ili prenizak pritisak je problem pritiska u koloni.

Najskloniji HPLC kvarovima i rješenjima

1, visoki pritisak je najčešći problem u upotrebi HPLC-a.To znači nagli porast pritiska.Općenito, postoje sljedeći razlozi: (1) Generalno, to je zbog blokade protočnog kanala.U ovom trenutku, trebali bismo ga ispitati po dijelovima.a.Prvo odrežite ulaz vakuumske pumpe.U ovom trenutku, PEEK epruveta je bila napunjena tečnošću tako da je PEEK cev bila manja od boce sa rastvaračem da bi se videlo da li tečnost kaplje po želji.Ako tečnost ne kaplje ili kaplje sporo, glava filtera za rastvarače je blokirana.Tretman: Potopiti u 30% azotnu kiselinu pola sata i isprati ultra čistom vodom.Ako tečnost kaplje nasumično, glava filtera otapala je normalna i provjerava se;b.Otvorite ventil za pročišćavanje tako da mobilna faza ne prođe kroz kolonu, a ako pritisak nije značajno smanjen, bijela glava filtera je blokirana.Tretman: Filtrirane bele tačke su uklonjene i sonikirane sa 10% izopropanolom pola sata.Pod pretpostavkom da pritisak padne ispod 100PSI, filtrirana bijela glava je normalna i provjerava se;c.Uklonite izlazni kraj kolone, ako se pritisak ne smanji, kolona je blokirana.Liječenje: Ako se radi o blokadi puferske soli, isperite 95% dok pritisak ne postane normalan.Ako je opstrukcija uzrokovana nekim bolje očuvanim materijalom, treba koristiti jači protok od sadašnje mobilne faze da se požuri prema normalnom tlaku.Ako se dugotrajni pritisak čišćenja ne smanji prema gore navedenoj metodi, može se smatrati da su ulaz i izlaz kolone spojeni na instrument naprotiv, a kolona se može očistiti mobilnom fazom.U ovom trenutku, ako se pritisak kolone još uvijek ne smanji, ulazna ploča sita za kolonu može se samo zamijeniti, ali kada rad nije dobar, lako je dovesti do smanjenja efekta kolone, pa pokušajte koristiti manje.Za teške probleme može se razmotriti zamjena stupca.

(2) Pogrešna postavka protoka: Ispravna brzina protoka se može resetovati.

(3) Pogrešan odnos protoka: indeks viskoznosti različitih proporcija protoka je različit, a odgovarajući sistemski pritisak protoka većeg viskoziteta je takođe veći.Ako je moguće, rastvarači nižeg viskoziteta mogu se zamijeniti ili ponovo postaviti i pripremiti.

(4) Odstupanje nule pritiska u sistemu: podesite nulu senzora nivoa tečnosti.

2, pritisak je prenizak (1) obično je uzrokovan curenjem sistema.Šta učiniti: Pronađite svaku vezu, posebno sučelje na oba kraja kolone, i zategnite područje curenja.Uklonite stup i zategnite ili obložite PTFE foliju odgovarajućom silom.

(2) Plin ulazi u pumpu, ali tlak je obično nestabilan u ovom trenutku, visok i nizak.Još ozbiljnije, pumpa neće moći da apsorbuje tečnost.Metoda tretmana: otvorite ventil za čišćenje i očistite brzinom od 3~5ml/min.Ako nije, mjehurići zraka su usisani na izduvnom ventilu pomoću namjenske iglene cijevi.

(3) Nema izlivanja mobilne faze: provjerite da li postoji mobilna faza u boci rezervoara, da li je sudoper uronjen u mobilnu fazu i da li pumpa radi.

(4) Referentni ventil nije zatvoren: referentni ventil je zatvoren nakon usporavanja.Obično se spušta na 0,1.~ 0,2mL/min nakon zatvaranja referentnog ventila.

Sažetak:

U ovom radu analiziraju se samo uobičajeni problemi u tečnoj hromatografiji.Naravno, u našoj praktičnoj primjeni naići ćemo na još drugih problema.U rukovanju greškama, trebali bismo slijediti sljedeće principe: mijenjati samo jedan po jedan faktor da bismo odredili odnos između hipotetičkog faktora i problema;Općenito, prilikom zamjene dijelova za rješavanje problema, trebamo obratiti pažnju na vraćanje demontiranih netaknutih dijelova na mjesto kako bismo spriječili gubitak;Formiranje dobre navike snimanja je ključ uspjeha u rješavanju grešaka.Zaključno, kada se koristi HPLC, važno je obratiti pažnju na prethodnu obradu uzorka i pravilan rad i održavanje opreme.