Najglasnije HPLC kvarove i rješenjima

Kao instrument visoko preciznosti, HPLC može lako dovesti do nekih problematičnih malih problema ako ne radi na ispravnom putu tokom upotrebe. Jedan od najčešćih problema je problem sa kompresijom stupaca. Kako brzo riješiti neispravan hromatograf. HPLC sistem se uglavnom sastoji od boce rezervoara, pumpe, injektora, stupca, komore za temperaturu stupca, detektora i sistema obrade podataka. Za cijeli sustav, stubovi, pumpe i detektori su ključne komponente i glavne lokacije koje su sklone problemima.

Ključ pritiska stupca je područje koje je potrebna bliska pažnja kada koristite HPLC. Stabilnost pritiska stupa usko je povezana sa kromatografskim vrhom, efikasnošću stupaca, efikasnost odvajanja i vreme zadržavanja. Stabilnost pritiska stupa ne znači da je vrijednost tlaka stabilna u stabilnoj vrijednosti, već da je raspon tlačnih fluktuacije između 345Ka ili 50psi (omogućavajući upotrebu gradijentnog elulacija kada je tlak stupa stabilan i polako mijenjaju). Previsok ili prenizak pritisak je problem pritiska stupca.

Najglasnije HPLC kvarove i rješenjima

1, visoki pritisak je najčešći problem u korištenju HPLC-a. To znači iznenadni porast pritiska. Općenito, postoje sljedeći razlozi: (1) Općenito, to je zbog blokade kanala protoka. U ovom smo trenutku trebali ispitati to komadno. a. Prvo, odsecite dovod vakuum pumpe. U ovom trenutku, cijev za Peek bio je napunjen tekućinom tako da je pied cijev bila manja od boce solventne da bi se vidjelo je li tečnost kaplje u volji. Ako se tečnost ne kaplje ili kaplje polako, glava filtra otapala je blokirana. Tretman: namočite u 30% dušičnu kiselinu pola sata i isperite sa ultrapušnom vodom. Ako tekući kapljice nasumično, glava filtra otapala je normalna i provjerava se; b. Otvorite klip za čišćenje tako da mobilna faza ne prođe kroz stupac, a ako pritisak ne bude značajno smanjen, filter bijela glava je blokirana. Tretman: Filtrirani bijeli glavi uklonjeni su i zbrkani sa 10% izopropanolom za pola sata. Pod pretpostavkom da je tlak padne ispod 100psi, filtrirana bijela glava je normalna i provjerava se; c. Uklonite izlazni kraj stupca, ako se pritisak ne smanji, stupac je blokiran. Tretman: Ako je to blokiranje slatkiša, isperite 95% dok pritisak nije normalan. Ako je opstrukcija uzrokovana još jednom sačuvanim materijalom, jači protok od sadašnjeg pokretne faze treba koristiti za žurbu prema normalnom pritisku. Ako se dugoročno pritisak čišćenja ne smanji prema gornjoj metodi, ulaz i utičnica stupca mogu se smatrati povezati na instrument naprotiv, a stupac se može očistiti pomoću mobilne faze. U ovom trenutku, ako se kolona još uvijek ne smanjuje, tanjur ulaz u stupcu može se zamijeniti samo, ali nakon što operacija nije dobra, lako je dovesti do smanjenja stupca, zato pokušajte koristiti manje. Za teške probleme može se uzeti u obzir zamjena stupca.

(2) Netačna postavka protoka: Ispravan protok može se resetirati.

(3) Netačan omjer protoka: indeks viskoznosti različitih proporcija tokova je različit, a odgovarajući pritisak sustava protoka s većom viskoznostima je veći. Ako je moguće, niži otapala viskoznosti mogu se zamijeniti ili ponovo postaviti i pripremiti.

(4) Tlak sustava Nula Drift: Podesite nulu senzora nivoa tečnosti.

2, pritisak je prenizak (1) obično je uzrokovan curenjem sistema. Što učiniti: Pronađite svaku vezu, posebno sučelje na oba kraja stupca i zategnite područje curenja. Uklonite post i zategnite ili postrojenite PTFE film s odgovarajućom silom.

(2) Gas ulazi u pumpu, ali tlak je obično nestabilan u ovom trenutku, visok i nizak. Više ozbiljnije, pumpa neće moći apsorbirati tekućinu. Metoda liječenja: Otvorite ventil za čišćenje i očistite po protoku od 3 ~ 5ml / min. Ako ne, mjehurići za zrak tezi su u ispušnom ventilu pomoću namjenske igle.

(3) Nijedan odliv mobilne faze: Provjerite postoji li mobilna faza u boci rezervoara, bilo da je sudoper uronjen u mobilnu fazu, a da li pumpa radi.

(4) Referentni ventil nije zatvoren: referentni ventil je zatvoren nakon usporavanja. Obično se spušta na 0,1. ~ 0.2ml / min nakon zatvaranja referentnog ventila.

Sažetak:

U ovom radu analiziraju se samo uobičajeni problemi u tečnoj kromatografiji. Naravno, u našoj praktičnoj primjeni naići ćemo na više drugih problema. U rukovanju grešanjem trebali bismo slijediti sljedeća principa: samo jedan faktor mijenjaju samo za određivanje odnosa između hipotetičkog faktora i problema; Općenito, prilikom zamjene dijelova za rješavanje problema trebali bismo obratiti pažnju na stavljanje demontiranih netaknutih dijelova na svoje mjesto za sprečavanje otpada; Formiranje dobrog rekordne navike je ključ uspjeha rukovanja kvarom. Zaključno, kada se koristi HPLC, važno je obratiti pažnju na uzorak prethodne obrade i pravilnog rada i održavanja opreme.