Kratak uvod u tehniku označavanja fosforizacije

Modifikacija fosforizacije igra ključnu ulogu u životu ćelija i utječe na više aspekata. Fosforilacija proteina usko je povezana s različitim biološkim procesima, kao što su popravak štete DNK, transkripciona regulacija, transkripcija signala i regulacije ćelijske apoptoze. Proučavanje fosforjenih proteina i peptida pomažu u otkrivanju mehanizama tih procesa i produbiti naše razumijevanje suštine životnih aktivnosti. Hong peptidna biotehnologija posjeduje zrelu tehnologiju pipnosti peptida. Ponovno iskorištava vlastite tehnološke i sirovine, možemo sintetizirati peptide koji sadrže fosforilirani serin (PSER), fosforilirani treonin (PTHPhorilirani tirozin (PTYR) i pružaju visokokvalitetne peptide s jednim do pet web stranica fosforizacije. 

Pregled tehnologije oznake fosforizacije: 

Fosforjeni peptidi uglavnom se odnose na bočne lančane hidroksilne grupe Serinskog (SER), tirozina (Tyr) i Theonine (ThR) ostataka u peptidnom lancu modificirane u kisele fosfatne estere. Fosforjeni peptidi igraju ključnu ulogu u proučavanju proteinskih fosforilacija. Stoga je posebno važno duboko istražiti reakcije fosforizacije proteina i peptida i pronaći zrele i jednostavne sintetičke metode. 

A brief introduction to the phosphorylation labeling technique

Trenutno su metode za modifikaciju peptida fosforizacije uglavnom spadaju u dvije kategorije: 

(1) direktno uključiti odgovarajuće zaštićene fosforizirane aminokiseline u peptidni niz: 

Prvo, aminokiseline koje trebaju biti fosforilirano (poput Thr, SER ili Tyr) podvrgnute su tretmanu fosforizacije i na odgovarajući način zaštićene. Zatim, nakon konvencionalnog procesa sinteze sa solidnim fazom peptida (SPPS), fosforilirani monomeri povezani su sa specifičnim mjestima polipeptida. Ova metoda je jednostavna za rad i postala je jedna od glavnih tehnika za modifikaciju peptida fosforizacije točke. 

(2) Nakon sintetizacije polipeptidnog sekvence na smoli, bočne lančane hidroksilne grupe SER, Tyr ili TP su fosforirane: 

Prilikom izvođenja modifikacije fosforizacije, ako se usvoji direktno kondenziranje fosforiliranih monomera u polipeptid, fosforilana aminokiselina, zbog većeg bočnog lanca, uzrokuje porast sterične prepreke, čineći kondenzaciju sa teptidnim lancem. Štaviše, uvođenje naknadnih aminokiselina postat će i relativno složeno, pogotovo kada postoje višestrukih telefonskih lokacija. Proces sinteze bit će izuzetno težak, a konačni proizvod bit će vrlo složen, čineći se odvajanje teško i prinos izuzetno nizak. Stoga, kada postoji više web lokacija koja zahtijeva fosforizaciju u polipeptidnom lancu, može se smatrati da ispunjava sintezu polipeptidnog slijeda na smoli, a zatim fosforjeti bočne lančane hidroksilne grupe SER, Tyr ili Thr. Tokom ovog procesa, prvo selektivno ukloni bočni lanac koji štiti grupe aminokiseline da bi se označile. Za Tyr i TH, nezaštićene aminokiseline njihovih bočnih lanaca mogu se izravno reagirati. Grupe zaštite bočnih lana može se kvantitativno ukloniti pod uvjetom 1% TFA / DCM. U ovoj metodi, aktivni srednji od benzilskog fosforamidata i tetrazola može se generirati reakcijom s posljednja, a može se povezati s hidroksilskom grupom. Tada se može izvršiti reakcija oksidacije pod uvjetima peroksida kiseline za generiranje fosphonyl grupe, dovršavanje fosforilacije.


Vrijeme objavljivanja: 2025-07-16