Pregled proteinskih izraza

Proteinexpression se odnosi na tehnologiju reproduciranja ciljanog gena u umjetni vektor, a zatim ga uvode u sustav primatelja ili sustav bez mobitela za izražavanje proteina u heterolognom sustavu.

Ekspresija proteina može riješiti problem koji su domaći proteini teško dobiti. Od prvog uspostavljanja heterolognih ekspresija proteina u 1970-ima, hiljade rekombinantnih proteina uspješno su izražene, što učinkovito promovira kontinuirani razvoj biotehnologije i biomedicinskog istraživanja i industrije.

Cilj:

Kroz ekspresiju proteina prvo je moguće dobiti proteine koji su teško dobiti iz prirodnih izvora.

Drugo, velika serija i visoka čistoća proizvoda za izražavanje proteina ne samo da olakšaju analizu ciljnog proteina, već i uvelike smanjenje troškova.

Što je još važnije, rekombinantni proteini obično se biraju kako bi ukazivali na visoku biološku sigurnost ćelije domaćina, izbjegavajući neke potencijalne rizike od biološke sigurnosti patogenog domaćina.

Metoda:

Uglavnom uključuje procese replikacije fragmenata gena, uvođenje u sistem izražavanja, inducirani izraz, pročišćavanje i analiza proizvoda.

Pregled proteinskih izraza

Klasifikacija:

Sistemi za izražavanje proteina uglavnom se mogu podijeliti na:

1. Nuklearni sistem za izražavanje: Escherichia COLI je najčešći sistem ekspresija proteina koji ima prednosti jasne genetske pozadine, praktične reprodukcije, niske troškove i visoki izraz. Međutim, nedostaje mu mehanizam za modifikaciju prevođenja i nije pogodan za glikozilaciju ili posebnu cijepanje izbora za izmjenu proteinskih izraza. Bacillus subtilis također se može koristiti za izraz proteina, a njegove prednosti su snažne metaboličke sposobnosti izražavanja i male protease aktivnosti, koja je postepeno privlačila pažnju.

2. Eukariotski sistem izražavanja: Određeni stupanj glikozilacije može se postići nakon prevoda, što je bliže prirodnoj aktivnosti eukariotskih proteina. Uglavnom je uključeno. Sistem ekspresije kvasca (uobičajeni crveni kvasac, piva sa kvascem, itd.), Kvasac može biti blag visokog gustoće, može se modificirati nakon prijevoda, ima prednosti prokariotskih i eukariotskih host ćelija, a također je dobar sistem za izraz proteina. Sistem ekspresije ćelija insekata: Egzogeni geni se prenose u ćelije insekata od strane baculovirus vektora za izraz. To je sistem visokog izražavanja za eukariotske proteine, koji je pogodan za membranske proteine, makromolekularne proteine, proteinske kinaze i druge proteine koji su teško izraziti u prokariotskom sistemu. ③ Sistem ekspresije ćelijskog izraza sisara: Prevođenje i efikasnost ukrasa ćelija sisavaca mnogo je veća od onog od kvasca i ćelijanskih sistema. Struktura i funkcija ćelija sisavaca bliži su izvornim eukariotskim proteinima, ali nivo izraze je nizak, a trošak visoki.

3. Sistem za izražavanje mobilnog materijala: Ciljni proteini mogu se izravno izraziti od čestica i sustava za izražavanje, a emplesi za emrijene iz Escherichia, retikulacije od zeca itd. Mogućnosti izražavanja proizvoda koji su teško izraziti u drugim sistemima, visokim troškovima i visokim troškovima i visokim troškovima i visokim troškovima.