1. Kakve su nečistoće u pročišćenim ne-HPLC-om?
O: Modificirane peptidne i ne modifikovane peptidne nečistoće u sirovom i desljednom modificiranom peptidu: poput ne-pune modificirane peptide i neke sirovine poput DTT, TFA, itd.
2. Koje nečistoće pročišćeni HPLC?
O: Modificirani peptid pročišćeni HPLC-om i dalje će imati puno nečistoća, a nečistoće su obično kratke peptide i malo TFA.
3. Koliko dugo je pogodno?
O: Sinteza modificiranog peptida mora razmotriti dužinu modificiranog peptida, punjenja, hidrofilnosti i hidrofobičnosti i drugih faktora. Duže ukupne dužine, manja čistoća i prinos sirovog proizvoda, te su veće poteškoće pročišćavanja i vjerojatnosti poteškoće u sintezi. Međutim, ne postoji način da se promeni redosled funkcionalne domene modifikovanog peptida, ali da bi se dovršila sinteza modifikovanog peptida, ponekad se u uzletoam i nizvodnoj domenu mogu dodati samo neke pomoćne aminokiseline za poboljšanje rastvorljivosti i hidrofobičnosti modificiranog peptida. Ako je modificirani peptid prekratak, u sintezi mogu biti problema. Prvi problem je što sintetizirani modificirani peptid ima određene poteškoće u procesu nakon obrade. Modificirani peptid unutar 5 peptida obično ima hidrofobne aminokiseline, u protivnom je post-obrada teška. Modificirani peptidi ispod 15 ostataka aminokiselina uglavnom se mogu dobiti sa zadovoljavajućim prinosom i prinosom.
Neka pitanja i odgovori o rastvorljivosti modificiranih peptida
4 Kako procijeniti rastvorljivost modificiranog peptida iz niza?
(1) Modificirani peptid koji sadrži visok udio hidrofobnih aminokiselina kao što su Leu, Val, Iie, ispunjeni, PHE i TRP nisu lako rastvorljivi u vodenoj otopini ili gotovo nerastvorljivim. Ova aminokiselina može biti problematična ili u pročišćavanju ili sintezi.
(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.
. Zašto je teško sintetizovati CYS, ispunjen ili TRP?
O: Modificirani peptidi koji sadrže CYS, ispunjeni ili TRP ne mogu se sintetizirati, a proizvodi visoke čistoće su teško dobiti. To je uglavnom zbog činjenice da su ove grupe manje stabilne i sklone oksidaciji. Upotreba i skladištenje ovih modificiranih peptida zahtijeva posebnu njegu za sprečavanje ponovljenog otvaranja poklopca.
6, zašto će neki sintetički prinos ili čistoća biti vrlo niski?
O: Postoji značajna razlika između sinteze modificiranih peptida i sinteze prajmera. Vrlo je malo temeljnih pripravnika koji se ne mogu sintetizirati, ali često postoje modificirani peptidi koji se ne mogu sintetizirati. Kao što su Val, Ile, Tyr i Trp, Leu, PHE, GLN, a aminokiselina u blizini ili petlje, modificirani peptidi ne mogu se protezati rastopiti u procesu sinteze, sintetička efikasnost je niža. Učinkovitost sinteze i čistoće proizvoda vrlo je niska u sljedećim slučajevima, kao što su: ponovite PRO, ser-ser, ponovite ASP, četiri uzastopna gly itd.
7. Kako se pročišćava?
O: Modifikovani peptidi uglavnom se pročišćavaju reverziranim stupcem (kao što su C8, C18 itd.) Na 214nm. Taferski sistem općenito je rješenje koje sadrži TFA, PH2.0. Buffera sadržavala je 0,1% TFAINDDH2O, a Bufferb sadržavao je 1% TFA / ACN / PH2.0. Bilo je rastvoreno u Bufferi prije pročišćavanja; Ako rješenje nije zadovoljavajuće, otapite sa Bufferb, zatim razrijedite Buffera; Za visoko hidrofobne modificirane peptide, dodaje se ponekad malo formacida ili sirćetne kiseline.
Vrijeme objavljivanja: 2025-07-01