Nakon hemijske sinteze peptida od strane FMOC-a solidne fazne, postoje mnoge metode cijepanja, a sada su uvedene dvije osnovne vrste koje obično koristimo.
1. Snažna kiselina metoda (TFA)
Suva smola postavljena je u tikvicu s protresom i dodana je odgovarajuća količina zamrzavanja. (Scangents) Trifluoroocetic Rezanje kiselina Rezanje (TFA), 10-25ml / g smola, ograničena i uzdrmana povremeno na sobnoj temperaturi s rotacijom. Smola je isušena, oprana 2-3 puta s novom TFA, filtrat je kombiniran, a 8-10 puta je odbačen zapremina ledenog dietil etera. Ponekad se neki TFA može pariti kako bi se dobili sirovi peptiri. Eter se može koristiti za povećanje efikasnosti padavina od strane hlađenja po ledu. Konačno, prikupljen je precipirani grubi peptidni proizvod.
Prikladna smola: Wang smola ili klizalište amidne smole
2, slaba kiselina metoda (TFA ili razrjeđivanje kiseline) 1% TFA:
1g smole koje sadrže peptide dodano je u čaša shaket tikvica diklometatnog otopina koja sadrži 1% TFA, zapečaćene i uzdrmaju 2 min. Filtrat je sa azotom pritisnut u drugu novu tikvicu metanola koja sadrži 10% piridin, a postupak je ponovljen 10 puta. Zaštitni peptidi koji su ostali na smoli tri puta su oprane pomoću 30ml DCM-a i 30ml meoh. Ostaci su provjereni i čistili TLC ili HPLC. Svi filtrirani su kombinirani i 5% otapala je kuhano pod smanjenim pritiskom. Dodana je četrdeset ml vode i oborine su pomognule uz rashladnu mešavinu. Nakon filtracije, proizvod je tri puta opranjen čistom vodom, postavljen u vakuumsku pećnicu i osušen sa Koh ili P2O5.
Razblažite sirćetnu kiselinu:
Peptidi obješeni na smoli su tretirani reznim rešenjem za 2 h koristeći acoh // TFE / DCM (2: 2: 6), smola je filtrirana, a smola je tri puta ispravljen rešenjem. Višak sirćetne kiseline uklonjeno je dodavanjem 15-preklopnih n-heksana u miješani filtrat i rotacijsku mrlju.
Primjena smola: 2-CTC smola
Vrijeme objavljivanja: 2025-07-01